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優秀實驗員的第一步——正確使用移液槍
更新時間:2023-03-15瀏覽:908次

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  優秀實驗員的第一步——正確使用移液槍

  移液槍在實驗室,但反復操作難免有失誤,所以說優秀的實驗員都是從正確使用移液槍開始的。

  移液槍使用訣竅

  移液槍是實驗操作上的工具,對于高手而言,重要的就是實驗的誤差最小,重復再現性好,那就要注意正確移液槍使用。

  1. 影響移液槍精度因素

  (1)溫度:室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發生誤差

  (2)氣密性:tip和槍體的結合部,以及槍內柱體之間的長期磨損,造成誤差

  (3)吸速:容易造成tip內氣泡產生,而且會污染槍頭

  (4)試劑的揮發:吸揮發性高的試劑時,蒸汽進入槍頭,內壓增高,結果在壓出液體時,壓力變大,而產生誤差。解決辦法:反復抽吸4-5次就可改善。

  2. 具體使用方法

  更換tip法:確。

  (1)調節旋鈕到所需刻度位置,訣竅:首先可略超過一些,再回旋至刻度。注意禁止超過最大刻度,避免人為誤差。

  (2)插上tip:無菌操作時,要注意動作迅速正確,不能用手碰tip,動作的力度要保持一致,禁止廢動作。普通操作時,可用拇指食指上緊,但手不能碰tip處。

  (3)指壓到第一段,tip接觸試劑。白色tip進到液面1 mm一下,黃色tip 2-3 mm,藍色tip2-4 mm,避免液壓的影響造成的誤差。

  (4)緩慢吸試劑,禁止速度過快,液體進入槍頭。

  (5)移出tip后,先在容器內壁輕輕靠住,使tip外壁液體流下。

  (6)將tip貼在目標容器內壁,輕輕按到第一段,壓出液體。

  (7)tip 在容器內壁略上滑動,保留少量液體,移出目標容器,手指卸掉 tip,注意不要使試劑濺出。

  一只tip分注法:不適用于揮發性,有毒性試劑。

  (1)同上述(1)-(4),移出液面后,先緩慢按到第一段,在用力按到第二段,將試劑全壓出。

  (2)同上述(3),緩慢吸出液體。

  (3)在目標容器液體上空,壓出試劑到第二段,注意壓的力度要和A相同,還應注意試劑不要四處飛濺。

  (4)緩慢返回第一段,可重復上述操作。達到目標容器原有液體不污染tip的目的。

  轉移數ul的貴重試劑時的方法:

  (1)同上述(1)-(4),移出液面后,在容器內壁輕按幾下,使外壁液體流下。白色tip進到液面1 mm以下,這最重要。

  (2)tip浸入目標容器的液面下,緩慢壓到第一段。

  (3)松開,返回到第一段,重新吸入液體,反復4-5次,,洗凈tip內壁液體。

  (4)將tip 移出液面,在內壁輕輕靠住,壓出液體到第二段。

  移液六部曲

  1. 裝吸頭

  移液器套柄用力下壓,需要時小幅度旋轉即可。

  錯誤操作:用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性。

  2. 量程設定

  操作之前請先選擇正確的移液器,移液器可在10-100%量程范圍內操作,但在10%量程處操作對于移液技巧要求高,故推薦在35-100%量程范圍內操作。

  量程調節:當由小量程調節至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉,旋轉到達超過所需量程1/3圈處再回調至所需量程。當由大量程調節至小量程時,直接連貫旋轉至所需量程。

  3. 潤洗

  用同一樣品重復吸液排液二至三次,潤洗為以后每次吸液提供相同的接觸面,保證操作的一致性。

  注意:高溫或者低溫液體請不要潤洗!

  4. 吸頭浸入角度

  吸液時盡量保持垂直狀態,傾斜角度不能超過20°。

  5. 吸頭浸入深度

  6. 吸頭浸入時間

  吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開,這對于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。

  7. 吸液速度

  勻速連貫移液,控制好移液速度,太快會造成噴液,液體或者氣霧沖入移液器內部,污染活塞等部件。

  8. 排液及吹液

  先將活塞按至第一檔排液,略作停頓后按至第二檔進行吹液。

  排液四種方式:

  9. 手溫

  移液器不宜長時間握在手里,不用時最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。

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